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四口蹄疫3(第2頁)

【病理變化】

患病動物的口腔、蹄部、乳房、咽喉、氣管、支氣管和胃黏膜可見到水疱、爛斑和潰瘍,上面覆蓋有黑棕色的癡塊。

反刍動物真胃和大小腸黏膜可見出血性炎症。

心包膜有彌漫性及點狀出血,心髒表面有灰白色或淡黃色的斑點或條紋,俗稱“虎斑心”。

心肌松軟似煮過的肉。

組織病理學檢查可見皮膚的棘細胞腫大呈球形,間橋明顯,滲出明顯乃至溶解。

心肌細胞變性、壞死、溶解,其釋放出有毒分解産物而使患病動物死亡。

【診斷】

根據流行病學、臨床症狀和病理剖檢特點可做出初步診斷,确診需要進行實驗室診斷。

1.病毒分離鑒定

(1)病料采集:

通常采集新鮮的水疱皮或水疱液,采後加入等量pH7.6含10%胎牛血清的組織培養液;

也可從剛發過病的動物采集病料,一般采集血液或用食道探杯刮取咽喉-食道分泌物;

死亡動物則可采集淋巴結、骨髓、甲狀腺或心肌等材料作為病料。

(2)分離鑒定:

病料制成20%的組織懸液,接種細胞培養物、未斷乳乳鼠等實驗動物。

口蹄疫病毒可在豬腎細胞、乳倉鼠腎細胞等細胞系中增殖并産生細胞病變,可緻死7日齡内乳鼠,必要時可進一步通過血清學試驗、聚合酶鍊式反應等檢測、鑒定病毒。

2.分子生物學診斷

随着分子生物學技術的迅猛發展,口蹄疫的診斷技術也得到了快速發展,主要有核酸雜交、RT-PCR等技術,使口蹄疫的診斷更加簡便、快捷、特異和敏感。

3.血清學試驗

血清學試驗常用于口蹄疫病毒毒型的鑒定,以便依據流行毒株的血清型選用同型口蹄疫疫苗,進行緊急免疫接種。

常用的血清學試驗有補體結合試驗(CFT)、(乳鼠病毒)中和試驗(NT)、免疫擴散沉澱試驗(IDPT)、熒光抗體技術等。

近年來,OIE推薦的間接夾心ELISA在國際貿易中廣泛使用,在數小時内可獲得試驗結果。

因為免疫接種動物3ABC抗體呈陰性,而感染動物3ABC抗體則呈陽性,因此,可通過檢測血清中口蹄疫病毒非結構蛋白3ABC抗體,區分感染動物和免疫接種動物。

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4.動物接種試驗

一般選2~7日齡純系乳小鼠,于頸背部皮下接種病毒感染液

0.2mL。接種小鼠通常于20~30h出現典型的口蹄疫症狀,發病乳小鼠運動不靈活,用鑷子夾住尾巴或四肢,常可發現其已失去知覺。随後四肢麻痹,呼吸迫促,最終死亡。

采集瀕死期或新死乳小鼠的骨骼肌,研磨制成10%的病料懸液,供傳代接種和鑒定用。也可選用豚鼠或乳兔進行試驗接種。

5.鑒别診斷

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